為什么要使用 Sulfazyme? PaS
2025-04-28市面上大多數硫酸酯酶來源于蝸牛、帽貝或鮑魚等生物,這些生物可能含有干擾代謝物和酶活性,從而導致結果不準確。Sulfazyme? PaS 為重組酶,純度 >90%。該酶已被證實僅具有硫酸酯酶活性,確保高度特異性和準確的水解。
圖 1.顯色法檢測磺胺類固醇酶和粗制蝸牛酶(Helix pomatia)的相對活性。(a) 25°C 下使用酚酞葡萄糖醛酸苷測定葡萄糖醛酸酶活性。(b) 37°C 下使用對硝基兒茶酚硫酸鹽測定硫酸酯酶活性。(c) 37°C 下使用鈣黃綠素-AM 測定酯酶活性。相對活性通過對最低活性進行標準化確定。[摘自 Sitasuwan N、McGee A、Lee LA。(2019 年)。使用純化的硫酸酯酶水解硫酸化類固醇、毒性內生菌和外來菌,以定量分析硫酸化和非結合化合物。第 67 屆美國質譜學會質譜及相關主題會議論文集,佐治亞州亞特蘭大。2019 年 6 月 2 日至 6 日。]
圖2.已知濃度的硫酸化代謝物在長達24小時內的水解曲線。(a)合成尿液(Surine?)與磺胺酶孵育后的硫酸皮質醇。(b)合成尿液(Surine?)與磺胺酶孵育后的硫酸他噴他多。(c)人血漿中與磺胺酶孵育后的硫酸他噴他多。[摘自Sitasuwan N、McGee A和Lee LA。(2019年)。使用純化的硫酸酯酶水解硫酸化類固醇、毒性內生菌和外來化合物,以定量分析硫酸化和非結合化合物。第67屆美國質譜學會(ASMS)質譜及相關主題會議論文集,佐治亞州亞特蘭大。2019年6月2日至6日。]
另一項研究比較了三種酶水解人尿液樣本中特布他林代謝物的解離效率。將IMCSzyme?和Sulfazyme? PaS(本文中稱為IMCS-PSF)與Helix pomatia β-葡萄糖醛酸酶(Sigma)進行了比較。在健康志愿者口服特布他林片劑前后采集尿液樣本。樣品分別在四種酶和樣品混合條件下進行處理(表1)。該研究表明,Sulfazyme? PaS比其他常用于分析特布他林的酶具有更高的水解效率(圖3)。
圖 3.特布他林代謝物在無酶、IMCSZyme、IMCS-PSF(磺胺酶 PaS)和粗酶條件下的水解時間曲線比較。數據以平均值±標準差 (n = 3) 表示。***p ≤ 0.001 基于方差分析。ANOVA:方差分析;SD:標準差。[引自 Wang FR, Fei J, Yu XL, Zhao XC, Wang Q, Metavarayuth K. (2018). Advancing the Analysis of Terbutaline in Urine Samples Using Novel Enzyme Hydrolysis. Bioanalysis. doi: 10.4155/bio-2018-0145.]
與IMCSzyme?結合使用時,Sulfazyme 可以更快、更有效地發現結合代謝物,而這些代謝物很難通過質譜法檢測到。
結合使用IMCSzyme和Sulfazyme PaS,可以快速檢測尿液中的苯基-γ-戊內酯 (PVL)。傳統方法需要6小時,而使用IMCSzyme和Sulfazyme酶的組合水解只需30分鐘。