Roche基因組學系列:DIG標記產品
2025-05-08與放射性材料相比,DIG系統是一種環保且更安全的替代品,是首選的非放射性核酸標記和檢測技術。DIG標記探針基于類固醇地高辛配基(DIG),可在多種應用中提供高靈敏度和低背景。此外DIG抗體不結合其他底物,具有出色的特異性。
DIG系統有兩大應用。這兩種應用方法都需要首先標記所需的DNA和RNA探針。
●膜雜交:使用膜或印跡檢測DNA或RNA。
●原位雜交:進行原位定位
通過PCR進行DIG DNA標記
在膜和原位雜交應用中,PCR是一種有效的標記方法。在模板有限、部分純化或長度超短的PCR應用,DIG標記探針是最理想的選擇。PCRDIG探針合成試劑盒包含堿不穩定性DIG-11-dUTP形成物,可在化學發光檢測后輕松去除DIG標簽,并可在后續研究中與多個DIG標記探針重新雜交。
DIG隨機引物DNA標記
在隨機引物DNA標記過程中,DNA模板可在存在六聚體引物和堿不穩定性DIG-11-dUTP條件下復制。該技術幾乎可標記任何長度的模板,尤其適合在基因組 Southern 印跡和重組文庫篩選應用中檢測單拷貝基因。
切口平移標記
切口平移通常用于標記探針以進行原位雜交。基于DNase I將隨機分布的切口引入DNA中的能力(隨后將其用作DNA聚合酶I合成DNA的引物),可通過切口平移將DIG-11-dUTP摻入新合成的DNA。作為原位雜交的首選方法,切口平移可為間接(免疫)檢測提供高靈敏度靶標。
RNA探針轉錄標記
對于某些應用,DIG標記RNA是比DIG標記DNA更有效的雜交探針。例如,其可從納克級總RNA中檢測稀有的mRNA。從DNA模板進行體外轉錄有助于產生大量全長DIG標記的RNA拷貝。
DIG寡核苷酸標記
DIG 標記合成寡核苷酸是一類出色的雜交探針,可用于原位雜交、斑點/狹縫印跡、文庫篩選,及檢測 Southern印跡上的重復基因序列。有幾種寡核苷酸 DIG標記方法,包括 DIG-NHS-酯5’末端標記、DIG-ddUTP3’末端標記、以及DIG-dUTP和 dATP3’加尾。
貨號 品名
11636090910PCR DIG 探針合成試劑盒
11277073910DIG RNA 標記混合物
11175025910DIG RNA 標記試劑盒 (SP6/T7)
11745832910DIG-High Prime DNA 標記和檢測起始試劑盒
I11585614910DIG-High Prime DNA 標記和檢測起始試劑盒 II